(10分)下列为凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(甲图)和洗脱(乙图)示意图,请据图回答下列问题。小-|||-山-|||-I-|||-"i-|||-缓 样 样 样-|||-冲 品 品 品-|||-液-|||-① ② ③ ④-|||-甲图小-|||-山-|||-I-|||-"i-|||-缓 样 样 样-|||-冲 品 品 品-|||-液-|||-① ② ③ ④-|||-甲图小-|||-山-|||-I-|||-"i-|||-缓 样 样 样-|||-冲 品 品 品-|||-液-|||-① ② ③ ④-|||-甲图(1)装填凝胶色谱柱时需要一次性________(填“缓慢"或“快速”)倒入,并轻轻敲打使凝胶装填紧密而不具有气泡,否则必须重装。(2)用吸管加样时须注意正确操作以避免破坏凝胶面,加样操作应如甲图所示吸管口沿管壁环绕移动进行,形成________(填“滴灌加样”或“贴壁加样”)。(3)凝胶色谱法分离血红蛋白的基本过程:样品加入后进行洗脱,而后收集血红蛋白,则该全过程中,共需要几次打开下端的流出口?________.收集血红蛋白样品时须把握好时机,即待_______________________________________时,用试管连续收集流出液。最后收集到的血红蛋白与刚洗脱时收集到的蛋白质相比,后者相对分子质量较________(填“大”或“小"),原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。某同学又利用电泳技术将得到的蛋白质样品进行分离,在电泳过程中,影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________________、________________以及分子的形状等。而在测定蛋白质相对分子质量时通常使用的电泳方法为___________________________________________________________________.(5)许多重要的生物大分子,如蛋白质、核酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上正电或负电.在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动.丙图表示模拟电泳现象的实验装置图,U型管左侧的颜色逐渐变深,原因最可能是_____________________________________。解析 (3)凝胶色谱法分离血红蛋白的过程的操作为调节缓冲液面,打开下端流出口,使缓冲液下降到与凝胶面平齐后关闭出口→加入蛋白质样品→打开下端出品,使样品渗入凝胶床内,等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口→洗脱:色谱柱上端连接缓冲液洗脱瓶,打开下端流出口→收集分装蛋白质,即可分离得到血红蛋白。(4)在测定蛋白质相对分子质量时通常使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。在凝胶中加入的SDS可与蛋白质形成“蛋白质—SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小.(5)由题图分析可知Fe(OH)3胶体粒子带正电荷,在电场作用下向阴极移动.

(10分)下列为凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(甲图)和洗脱(乙图)示意图,请据图回答下列问题。

(1)装填凝胶色谱柱时需要一次性________(填“缓慢"或“快速”)倒入,并轻轻敲打使凝胶装填紧密而不具有气泡,否则必须重装。

(2)用吸管加样时须注意正确操作以避免破坏凝胶面,加样操作应如甲图所示吸管口沿管壁环绕移动进行,形成________(填“滴灌加样”或“贴壁加样”)。

(3)凝胶色谱法分离血红蛋白的基本过程:样品加入后进行洗脱,而后收集血红蛋白,则该全过程中,共需要几次打开下端的流出口?________.收集血红蛋白样品时须把握好时机,即待_______________________________________

时,用试管连续收集流出液。最后收集到的血红蛋白与刚洗脱时收集到的蛋白质相比,后者相对分子质量较________(填“大”或“小"),原因是_________________________________________________________________________________________________________________________________________。

(4)电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。某同学又利用电泳技术将得到的蛋白质样品进行分离,在电泳过程中,影响蛋白质迁移速度的因素包括蛋白质分子的________________、________________以及分子的形状等。而在测定蛋白质相对分子质量时通常使用的电泳方法为___________________________________________________________________.

(5)许多重要的生物大分子,如蛋白质、核酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带上正电或负电.在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动.丙图表示模拟电泳现象的实验装置图,U型管左侧的颜色逐渐变深,原因最可能是_____________________________________。

解析 (3)凝胶色谱法分离血红蛋白的过程的操作为调节缓冲液面,打开下端流出口,使缓冲液下降到与凝胶面平齐后关闭出口→加入蛋白质样品→打开下端出品,使样品渗入凝胶床内,等样品完全进入凝胶层后,关闭下端出口→洗脱:色谱柱上端连接缓冲液洗脱瓶,打开下端流出口→收集分装蛋白质,即可分离得到血红蛋白。(4)在测定蛋白质相对分子质量时通常使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳。在凝胶中加入的SDS可与蛋白质形成“蛋白质—SDS复合物”,使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小.

(5)由题图分析可知Fe(OH)3胶体粒子带正电荷,在电场作用下向阴极移动.