题目
下列基因缺失或插入的诊断方法,正确的是()A. 反向点杂交B. PCR-ASOC. Western印迹D. 跨越断裂点PCR(Gap-PCR)E. RT-PCR
下列基因缺失或插入的诊断方法,正确的是()
A. 反向点杂交
B. PCR-ASO
C. Western印迹
D. 跨越断裂点PCR(Gap-PCR)
E. RT-PCR
题目解答
答案
D. 跨越断裂点PCR(Gap-PCR)
解析
本题考查基因缺失或插入的诊断方法相关知识点。解题思路是需要对每个选项所涉及的技术原理和适用范围有清晰的了解,然后判断其是否适用于基因缺失或插入的诊断。
- A选项:反向点杂交
反向点杂交是将已知的不同突变探针固定在膜上,然后用经过标记的待测样本DNA与之杂交,主要用于检测已知的基因突变类型,并非专门针对基因缺失或插入的诊断方法。 - B选项:PCR - ASO
PCR - ASO(聚合酶链反应 - 等位基因特异性寡核苷酸探针)技术是先通过PCR扩增目的基因片段,然后用针对正常和突变等位基因的特异性寡核苷酸探针进行杂交检测,主要用于检测已知的点突变,对于基因缺失或插入的诊断效果不佳。 - C选项:Western印迹
Western印迹是将蛋白质经电泳分离后转移到固相载体上,再用特异性抗体进行检测,主要用于检测蛋白质的表达水平和分子量等信息,不能用于基因缺失或插入的诊断。 - D选项:跨越断裂点PCR(Gap - PCR)
跨越断裂点PCR是设计引物跨越可能发生缺失或插入的区域进行PCR扩增。如果存在基因缺失或插入,扩增产物的大小会与正常情况不同,通过分析扩增产物的大小就可以判断是否存在基因缺失或插入,所以该方法适用于基因缺失或插入的诊断。 - E选项:RT - PCR
RT - PCR(逆转录聚合酶链反应)是先将RNA逆转录为cDNA,然后进行PCR扩增,主要用于检测基因的转录水平,即检测mRNA的表达情况,不能直接用于基因缺失或插入的诊断。