经限酶酶切、电泳分离后再将 DNA 转移至硝酸纤维素膜上杂交的技术是( )A. Northern blottingB. Southern blottingC. Western blottingD. dot blottingE. in situ hybridization

本题考查分子生物学中不同 blotting 技术的核心区别，关键在于明确每种技术的操作对象和流程：

• Southern blotting：用于检测 DNA，流程为 限制酶切割 → DNA 电泳 → 转膜 → DNA 探针杂交。
• Northern blotting：用于 RNA 检测，流程类似但操作对象为 RNA。
• Western blotting：用于蛋白质检测，需用抗体而非探针。
• dot blotting：无需电泳，直接点样。
• in situ hybridization：直接在组织/细胞中杂交，无需电泳。

破题关键：题目明确提到“DNA”和“硝酸纤维素膜”，直接对应 Southern blotting。

选项分析

1. A. Northern blotting

   • 对象：RNA
   • 关键步骤：RNA 电泳、转膜、RNA 探针杂交
   • 排除理由：题目明确涉及 DNA，而非 RNA。

2. B. Southern blotting

   • 对象：DNA
   • 关键步骤：限制酶切割 DNA → DNA 电泳 → 转膜 → DNA 探针杂交
   • 匹配度：完全符合题干描述。

3. C. Western blotting

   • 对象：蛋白质
   • 关键步骤：蛋白质电泳、转膜、抗体检测
   • 排除理由：操作对象与题目中的 DNA 不符。

4. D. dot blotting

   • 特点：无需电泳，直接将样本点样至膜上
   • 排除理由：题干明确包含电泳分离步骤。

5. E. in situ hybridization

   • 特点：直接在组织或细胞切片中杂交，无需电泳
   • 排除理由：与题干中的电泳和转膜步骤矛盾。