题目
可能导致RNA降解的样本处理错误是A | 4^circmathrm(C)保存超过48小时B | 反复冻融全血样本C | 立即加入RNA保护剂D | 使用RNasefree耗材
可能导致RNA降解的样本处理错误是 A | $4^{\circ}\mathrm{C}$保存超过48小时 B | 反复冻融全血样本 C | 立即加入RNA保护剂 D | 使用RNasefree耗材
题目解答
答案
可能导致RNA降解的样本处理错误是 **A(4°C保存超过48小时)和B(反复冻融全血样本) **。
### **错误选项分析:**
1. **A. 4°C保存超过48小时**
RNA在4°C环境中容易因内源性RNA酶活性未被完全抑制而降解。虽然短期(如24小时内)保存可能可行,但超过48小时会显著增加降解风险。正确做法是将样本立即用液氮速冻后长期保存于-80℃,或加入RNA保护剂(如RNAlater)后4°C短期保存。
2. **B. 反复冻融全血样本**
反复冻融会破坏细胞结构,释放内源性RNA酶,导致RNA降解。研究明确指出,组织或全血样本反复冻融是RNA降解的主要原因之一,应避免多次冻融,优先使用新鲜样本或单次冻存后直接提取RNA。
### **正确选项排除:**
- **C. 立即加入RNA保护剂**
正确操作。RNA保护剂(如RNAlater)可抑制RNA酶活性,防止样本中RNA降解,是标准的样本保存流程。
- **D. 使用RNase-free耗材**
正确操作。所有接触RNA的器材和试剂均需经过RNase处理(如DEPC处理或使用专用RNase-free耗材),以避免外源性RNA酶污染。
### **总结:**
RNA降解的核心原因包括**RNA酶污染**(外源性或内源性)和**样本处理不当**(如反复冻融、不恰当的保存条件)。因此,**A和B是明确的错误处理方式**,而C和D是必要的防护措施。