题目
DNA的解链温度指的是A. A260nm达到最大值时的温度B. A260nm达到最大值的50%时的温度C. DNA开始解链时所需要的温度D. DNA完全解链时所需要的温度E. A280nm达到最大值的50%时的温度
DNA的解链温度指的是
A. A260nm达到最大值时的温度
B. A260nm达到最大值的50%时的温度
C. DNA开始解链时所需要的温度
D. DNA完全解链时所需要的温度
E. A280nm达到最大值的50%时的温度
题目解答
答案
B. A260nm达到最大值的50%时的温度
解析
考查要点:本题主要考查DNA解链温度(Tm值)的定义及其与紫外吸光度(A260nm)变化的关系。
解题核心思路:
DNA解链过程中,双链结构破坏导致单链比例增加,A260nm吸光度随之上升。解链温度Tm是指DNA双链解链一半时的温度,此时A260nm达到最大值的50%。需区分“开始解链”“完全解链”与“半解链”状态的差异,并明确检测波长(A260nm而非A280nm)。
破题关键点:
- Tm的定义:半解链温度,非完全解链温度。
- 吸光度特征:A260nm最大值的50%对应Tm,而非最大值本身。
- 检测波长:DNA检测使用A260nm,A280nm易受蛋白质干扰。
DNA双链结构在加热过程中逐渐解链为单链,此过程伴随紫外吸光度(A260nm)的增加。具体分析如下:
-
A260nm的变化规律:
- 双链状态:A260nm较低。
- 解链过程:随着温度升高,双链打开,A260nm逐渐上升。
- 完全解链:A260nm达到最大值。
-
Tm值的定义:
Tm值是DNA双链解链一半(即50%单链、50%双链)时的温度。此时,A260nm达到最大值的50%,而非最大值本身。 -
选项辨析:
- A:A260nm最大值对应完全解链,非Tm定义。
- B:正确,Tm对应最大值的50%。
- C/D:开始/完全解链温度与Tm无关。
- E:检测波长应为A260nm,A280nm不适用。