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题目

DNA的解链温度指的是A. A260nm达到最大值时的温度B. A260nm达到最大值的50%时的温度C. DNA开始解链时所需要的温度D. DNA完全解链时所需要的温度E. A280nm达到最大值的50%时的温度

DNA的解链温度指的是

A. A260nm达到最大值时的温度

B. A260nm达到最大值的50%时的温度

C. DNA开始解链时所需要的温度

D. DNA完全解链时所需要的温度

E. A280nm达到最大值的50%时的温度

题目解答

答案

B. A260nm达到最大值的50%时的温度

解析

考查要点:本题主要考查DNA解链温度(Tm值)的定义及其与紫外吸光度(A260nm)变化的关系。

解题核心思路:
DNA解链过程中,双链结构破坏导致单链比例增加,A260nm吸光度随之上升。解链温度Tm是指DNA双链解链一半时的温度,此时A260nm达到最大值的50%。需区分“开始解链”“完全解链”与“半解链”状态的差异,并明确检测波长(A260nm而非A280nm)。

破题关键点:

  1. Tm的定义:半解链温度,非完全解链温度。
  2. 吸光度特征:A260nm最大值的50%对应Tm,而非最大值本身。
  3. 检测波长:DNA检测使用A260nm,A280nm易受蛋白质干扰。

DNA双链结构在加热过程中逐渐解链为单链,此过程伴随紫外吸光度(A260nm)的增加。具体分析如下:

  1. A260nm的变化规律:

    • 双链状态:A260nm较低。
    • 解链过程:随着温度升高,双链打开,A260nm逐渐上升。
    • 完全解链:A260nm达到最大值。
  2. Tm值的定义:
    Tm值是DNA双链解链一半(即50%单链、50%双链)时的温度。此时,A260nm达到最大值的50%,而非最大值本身。

  3. 选项辨析:

    • A:A260nm最大值对应完全解链,非Tm定义。
    • B:正确,Tm对应最大值的50%。
    • C/D:开始/完全解链温度与Tm无关。
    • E:检测波长应为A260nm,A280nm不适用。

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