动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养,下列叙述正确的是(C) A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 都可体现细胞的全能性D动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物,植物体细胞离体培养体现的是全能解析:性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养:、动物细胞的培养:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细1 胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。 、动物细胞培养液的成分:葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。2 、动物细胞培养液的特点:液体培养基含动物血清。3 、动物细胞培养需要满足以下条件4 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 ~7.4。7.20.5(2)适宜的温度:36.5℃±℃;适宜的pH:无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素,(3) 防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。此外,应定期更换培养液,以防培养过程中的污染。的主要作用是维持培养液是细胞代谢所必需的,。气体环境:(4)95%空气+5%COOCO222 的pH。 、动物细胞培养的过程:5→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)取动物组织块.分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰 蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 )2下列关于细胞工程的叙述,错误的是(D 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合A.B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体C.D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同电刺激)化学法(聚乙二醇 振动 解析:A正确诱导原生质体融合的方法有物理法(离心将动物组B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶,)生物方法(灭活的病毒). PEG正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C错误,假设甲植D淋巴细胞融合既可以无限增殖,又可产生特异性抗体。原免疫小鼠的B;而甲乙品种2N+2M2N,乙植物体细胞是2M,甲乙体细胞杂交染色体数目为物体细胞是 。杂交染色体数目是N+M )制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括(3A①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植A. ①② B.①③ C.②③ D.③④ B. 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞,经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 C. SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是(D) D. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体 E. SARS体外培养单个浆细胞可以获得大量针对B. F. PEG 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 G. 利用该单克隆抗体与SARS淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯B错误 一个解析:A单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的,杂交瘤细胞是由浆细B错误 度低、特异性差; C错误制备单克隆抗体过程中的筛选:筛选是将未融合的胞与骨髓瘤细胞融合形成的;瘤融筛选出B瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰,淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出合的细胞。筛选是将产生特定抗体的B淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所以B来。因为从体内取免疫过的 需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。() 用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体 解析:动物细胞没有细胞壁,所以不需要纤维素酶去除细胞壁某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体6外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细 胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。(1) 多___。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量_血清可以补充合成培在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是(2) ____。细胞培养应在含5%的CO的恒温培养箱中进行,CO_的作用是22. H 维持培养液_______。。药物试验需要大量细停止(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长_____。若用动物的肝脏组织_胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更___多__ ___块制备肝细胞悬液,需用_胰蛋白酶_消化处理。 抗生素(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的_________。对甲细胞生过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物(5)已知癌细胞XY组细胞培养液两组,长的影响,可将甲细胞分为A、BA组细胞培养液中加入__Y_____,B、中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A 两组细胞中的__mRNA的药效。Y___合成水平的差异,确定____或____蛋白质B 回答下列有关细胞培养的问题7细胞会停止时,__相互接触____(1)在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面___单层瓶壁上形成的细胞层数是接触抑制这种现象称为细胞的________。此时,分裂增殖,______胰蛋白酶。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是_________ 。_______现象;(2)衰老甚至死亡____随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现_细但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________不死性 _____。减少)______胞,该种细胞的黏着性__降低,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白的量_______现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原(3) 。_____因是_由于死细胞膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色期的细胞用显_检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到_中___(4) 微镜进行观察。条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中______超低温__在细胞培养过程中,通常在(5). ________________酶的活性降低,细胞_给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮(6) 进行攻击。__抗原______肤组织当作 如图所示为单克隆抗体制备过程示意图。8能产生抗体 骨髓瘤细胞-|||-的淋巴细胞-|||-两种细胞融合培养-|||-选择杂交瘤细胞-|||-、-|||-克隆-|||-、c殖特定的克隆-|||-通过体外细 通过体内杂-|||-胞培养产生 殖产生单克-|||-瘤细胞繁-|||-单克隆抗体-|||-U 隆抗体 ___具有一定的流动性_______。此过程,常用_聚乙二醇____作为诱导剂,杂交瘤细胞繁殖进行的是有丝分裂。该细胞的特点(遗传性状)是___既能大量增殖又能产生特异性抗体__。 __培养液中加入氨基蝶呤,收集增殖的细胞______________。 _液体培养基含有 。___葡萄糖和动物血清. __。任何正常细胞,故称为“生物导弹”,这是利用了___抗原与抗体之间结合的高度特异性动物___________动物细胞融合和(5)在单克隆抗体制备过程中,还应用了细胞工程中的 两大技术。细胞培养______ _ 值),可判断该化学物质的毒性。养细胞的百分数(以下称Q材料用具:活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓(2)滴管、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、度的龙胆紫溶液、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的 高倍显微照片。 (3)实验步骤:转入锥形瓶中,加入胰蛋白酶Ⅰ.制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎, 液处理,使胚胎组织离散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。 Ⅱ.进行细胞培养。B、C3个洁净的培养瓶,_消毒 、①.取A灭菌 加入等量的细胞悬浮液_____________; 两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液, 瓶中加入等量的蒸馏水,摇匀; ③.把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。 Ⅲ.制作临时装片。. _ _______并与__C进行对比,统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。 (4)结果分析与结论:,Q=1.3%=12.5%,Q值依次为:、①.经研究人员实验得知,A、BC三个培养瓶的QBA ______甲乙都是有毒性的且乙的毒性大于甲。=0.1%Q,由此可知该实验的结论是____C动物细胞在正常培养状态瓶的CQ值说明_作用,对照培养瓶起②.在实验中,C________ __。下染色体变异频率非常低10下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图,请据图回 答下列问题:能产生抗体 骨髓瘤细胞-|||-的淋巴细胞-|||-两种细胞融合培养-|||-选择杂交瘤细胞-|||-、-|||-克隆-|||-、c殖特定的克隆-|||-通过体外细 通过体内杂-|||-胞培养产生 殖产生单克-|||-瘤细胞繁-|||-单克隆抗体-|||-U 隆抗体 __动物细胞培养________。 ___吞噬细胞_______细胞处理后,才能被免疫细胞识别。②过程常在___灭火的病毒________诱导下完成,④过程与体外培养相比,其优点是__不需特定的培养基,不需严格的外界环境条件___________。 _特异性___________。 _____MⅡ中______期的卵母细胞做受体细胞,原因是__MⅡ期卵母细胞体积大,易操作,含有促使细胞核全能性表达的物质和营养添加________。若不考虑环境因素影响,克隆羊的性状全部像白面绵羊吗?_____不是________。原因是_卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状___________。 ___D________。 有选择地繁殖某一性别的家畜 繁殖家畜中的优良个体 用于保存物种 改变动物的核基因 ____C______。 卵细胞大,便于操作 卵细胞含有的营养物质多 卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达 重组细胞才具有全能性

解析：单克隆抗体的制备过程是 人工诱导经过免疫的 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特 定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 利用细胞工程方法，以 SARS 病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ D ） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 病毒的单克隆抗体 SARS 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对 B. 诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经 C. PEG 病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 D. 利用该单克隆抗体与 SARS 淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯 B 错误 一个解析： A 单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的，杂交瘤细胞是由浆细 B 错误 度低、特异性差； B C 错误 制备单克隆抗体过程中的筛选：筛选是将未融合的 胞与骨髓瘤细胞融合形成的； 瘤融筛选出 B 瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及 BB 融合、瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出合的细胞。筛选是将产生特定抗体的 B 淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以 B 来。因为从体内取免疫过的 需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞 。 () 用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 淋巴细胞 BA. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 B. 用纤维素酶处理 B 用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 C. D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 解析： 动物细胞没有细胞壁，所以不需要纤维素酶去除细胞壁 某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体 6 外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细 胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题： 将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。 (1) 多 ___ 。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量 _ 血清可以补充合成培 在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是 (2) 养基中缺乏的物质 _ ___ 。细胞培养应在含 5% 的 CO 的恒温培养箱中进行， CO_ 的作用是 22 ． pH 维持培养液 _______ 。。药物试验需要大量细 停止 (3) 在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 __ _ __ 。若用动物的肝脏组织 _ 胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 ___ 多 __ ___ 块制备肝细胞悬液，需用 _ 胰蛋白酶 _ 消化处理。 抗生素 (4) 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 _ _ _______ 。对甲细胞生过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物 (5) 已知癌细胞 XY 组细胞培养液两组，长的影响，可将甲细胞分为 A 、 BA 组细胞培养液中加入 _ _Y___ __ ， B 、中加入无菌生理盐水，经培养后，从 A 、 B 两组收集等量细胞，通过分别检测 X 基因在 A 两组细胞中的 __ mRNA 的药 效。 Y __ _ 合成水平的差异，确定 ____ 或 ___ _ 蛋白质 B 回答下列有关细胞培养的问题 7 细胞会停止时， __ 相互接触 ____(1) 在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面 ___ 单层 瓶壁上形成的细胞层数是 接触抑制 这种现象称为细胞的 ________ 。此时，分裂增殖， ______ 胰蛋白酶 。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 _________ 。 _______ 现象； (2) 衰老甚至死亡 ____ 随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现 _ 细但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞 会因遗传物质发生改变而变成 __ __ ____ 不死性 _____ 。 减少 )______ 胞，该种细胞的黏着性 __ 降低 ，细胞膜表面蛋白质 ( 糖蛋白的量 __ _____ 现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原 (3) 。 _____ 因是 _ 由于死细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色 期的细胞用显 _ 检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到 _ 中 ___(4) 微镜进行观察。条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 ______ 超低温 __ 在细胞培养过程中，通常在 (5) ． 的速率降低。 新陈代谢 ________________ 酶 的活性降低，细胞 _ 给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮 (6) 进行攻击。 __ 抗原 ______ 肤组织当作 淋巴 _ 具有一定的流动性 聚乙二醇 有丝 _ 既能大量增殖又能产生特异性抗体 培养液中加入氨基蝶呤，收集增殖的细胞 ___ 液体培养基含有 葡萄糖和动物血清． 抗原与抗体之间结合的高度特异性动物 动物细胞融合 细胞培养 现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通 过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强 弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题： 。根据这种变异细胞占全部培 有毒物质能诱导细胞产生染色体变异 实验原理： (1)_________ 值 ) ，可判断该化学物质的毒性。养细胞的百分数 ( 以下称 Q 材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓 (2) 滴管、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、度的龙胆紫溶液、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的 高倍显微照片。 (3) 实验步骤：转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶Ⅰ．制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎， 液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。 Ⅱ．进行细胞培养。 B 、 C 3 个洁净的培养瓶， _ 消毒 、①．取 A 灭菌 加入等量的细胞悬浮液 _____________ ； ②．向 A 、 B 两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液， C 瓶中加入 等量的蒸馏水 ，摇匀； ③．把 3 个培养瓶放在 37 ℃的恒温箱中培养。 Ⅲ．制作临时装片。． 个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，代左右时，同时从恒温箱中取出 3 ①．当细胞增殖到大约 8 加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；滴在与培养瓶有相同编②．静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液， 号的载玻片的中央， _ 用适宜浓度龙胆紫进行染色 ___ ， 3 ～后，盖上盖玻片。 5min Ⅳ．镜检和统计。期的细胞， _ 把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于 有丝分裂中 _____ _______ 并与 __ C 进行对比，统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数 (Q 值 ) 。 (4) 结果分析与结论：， Q=1.3%=12.5% ， Q 值依次为：、①．经研究人员实验得知， A 、 BC 三个培养瓶的 Q BA ______ 甲乙都是有毒性的且乙的毒性大于甲 。 =0.1%Q ，由此可知该实验的结论是 ____ C 动物细胞在正常培养状态 瓶的 CQ 值说明 _ 作用， 对照 培养瓶起②．在实验中， C____ ____ __ 。 下染色体变异频率非常低 10 下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回 答下列问题： (1) 图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是 __ 动物细胞培养 ________ 。 (2) 图甲中①注射病原入小鼠体内后，要经过 ___ 吞噬细胞 ___ ____ 细胞处理后，才能被免疫细胞识别。②过程常在 __ _ 灭火的病毒 __ ______ 诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是 __ 不需特定的培养基，不需严格的外界环境条件 ___________ 。 (3) 单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其 _ 特异性 ___________ 。 (4) 图乙过程常选择 _____ M Ⅱ中 ______ 期的卵母细胞做受体细胞，原因是 __ M Ⅱ期卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养添加 ________ 。若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？ _____ 不是 ________ 。原因是 _ 卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状 ___________ 。 (5) 图乙过程的技术具有多种用途，但是不能 ___ D ________ 。 A ．有选择地繁殖某一性别的家畜 B ．繁殖家畜中的优良个体 C ．用于保存物种 D ．改变动物的核基因 (6) 在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是 ____ C ______ 。 A ．卵细胞大，便于操作 B ．卵细胞含有的营养物质多 C ．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达 D ．重组细胞才具有全能性