名词解释 连续培养反应器:不断地往反应器中加入营养物,利用罐中的菌体增 殖得到产物,并不断采出。在良好的控制下,罐内菌体的增殖速度可 以与采出速度相同而达到稳态。菌体比生长速率(卩):单位浓度菌体在一定条件下引起的反应速率, 其值反映了培养菌体增长的能力,受菌株及各种物理化学环境的影响.表示为卩二dx.x.dt得率系数:两种物质得失之间的计量比。 Yx/s,Yp/s贴壁培养:贴壁依赖性细胞在培养中要贴附于壁上才能迅速铺展 ,开 始有丝分裂并迅速进入对数生长期,这种培养方式就叫贴壁培养.多 数动物细胞的培养都米取这种方式.蛋白质的复性:包含体蛋白质溶解于变性剂溶液中,呈变性状态,所 有的氢键、疏水键全部被破坏,疏水侧链完全暴露,但一级结构和共 价键不被破坏,当除去变性剂后,一部分蛋白质可以自动折叠成具有 活性的正确构型,这一折叠过程称为蛋白质复性。浓差极化:指在分离过程中,料液中的溶剂在压力驱动下透过膜,溶 质被截留,于是在膜表面与临近膜面区域浓度越来越高。 在浓度梯度作用下,溶质由膜面向本体溶液扩散,形成边界层,使流体阻力与局 部渗透压增加,从而导致溶剂透过量下降。溶剂向膜面流动引起溶质 向膜面的流动,这种流动如果与浓度梯度所驱动的溶质向本体溶液扩 散的速度平衡时,在膜面附近就形成一个稳定的浓度梯度区, 这一区 域就称为浓度极化边界层,这一现象称为浓差极化。浓差极化是一个可逆的过程;膜污染:物料中的微粒、胶体粒子或溶质大分子由于与膜存在物理化 学相互作用或机械作用而引起的在膜表面或膜孔内吸、沉积造成膜孔 径变小或堵塞,使膜产生透过流量与分离特性的不可逆变化的现象。 排阻色谱又称凝胶色谱或凝胶渗透色谱,是利用被分离物质分子量大 小的不同和在填料上渗透程度的不同, 以使组分分离。常用的填料有 分子筛、葡聚糖凝胶、微孔聚合物、微孔硅胶或玻璃珠等,可根据载 体和试样的性质,选用水或有机溶剂为流动相。非线性色谱基本理论包括吸附平衡热力学、吸附平衡动力学和色谱基 本特料平衡方程。V非线性色谱的柱效与柱长成比例增长。x在非线性色谱中,峰高增加的速率随浓度的增加而逐渐降低,因而峰 高不能作为定量分析的指标。X超载洗脱、前沿分析和置换展开是非线性色谱中常用的 3种操作方式。V非线性色谱中只用细的颗粒。x凝胶过滤中进样体积和样品的浓度将明显地影响蛋白质的。V膨化的凝胶可以直接高温烘干。x凝胶层析的分离原理是分子筛作用。V一般来说只要能溶解被洗脱物质并不使其变性的缓冲液都可以用于凝胶层析。V离子交换用的层析柱一般粗而短,不宜过长。VHPLC中分离柱是色谱的中心,是最为关键的部分。VSuperdax是葡聚糖与交联琼脂糖的结合,而Superose是珠状琼脂糖 经两次交联。V反相色谱以硅胶基质的键合相填料为主, 特别是键合C18, C8烷基以及苯基填料。V不同填料的化学结构是通过对基质材料的化学改性而实现的。V 疏水性相互作用色谱是为了适应活性生物大分子特别是蛋白质的分 离而发展起来的种液相色谱方法。V通过氯硅烷可以将各种烷基链引入硅胶表面。V作为分离材料的硅胶,其颗粒的形状与大小、孔的结构、孔径及其分 布、总孔容、比表面积及机械强度等,均为重要的物理参数。V硅胶的化学修饰大致可以三种不同的方式进行, 即整体修饰、通过表面硅羟基的化学修饰以及涂层法。V物理吸附水的去除是硅胶衍生反应中不可或缺的一步。V硅胶一般有耐受高压力,耐压能力随孔径及孔度而下降。V羟基磷灰石与生物组织有特异性的亲和力和相容性。V羟基磷灰石是一种弱阳离子或弱阴离子交换层析材料。V制备羟基磷灰石的方法通过有干法、水热法和湿法三种。V羟基磷灰石作为色谱样填充介质能提供专一的选择性、高的键合容量、低的非可逆性吸附以及化学稳定性和热稳定性好, 完全满足HPLC样的要求。V羟基磷灰石能精确地分离,纯化结构上只有微小差别的生物大分子。V泳动度(迁移率)只取决于带电质点的性质。X聚丙烯酰胺凝胶电泳具有电泳和分子筛双重作用。V浓度和交联剂浓度决定胶的物理状态及分子筛的孔径的大小。V电泳中缓冲液的种类,浓度和其他电解质浓度影响蛋白质所带电荷的 极性和数量,同时还影响蛋白质分子间的相互作用。V电泳技术主要是用于蛋白质和核酸类物质的分析和分离。V采用径向流技术,可以在较小的柱床层高度时使用较大的流动相速度。V径向色谱在较高流动相速度时,反压降低。V径向色谱可以线性地增加样品处理量,样品可以在完全相同的色谱条件下直接放大。V 目前径向色谱柱使用的填料主要有离子交换树脂和亲和色谱两种。 V 选择具高选择的填料可以克服径向色谱直径短的缺点 ,发挥径向色谱 柱速度快,处理量大的优点。V纯度衡量有电泳法 层析法及质谱法等。一般应采用二种以上方法,而且同一原理的方法可以采用二次( )