题目
当A280达到最大值的一半时,所对应的温度称为熔解温度。A. 对B. 错
当A280达到最大值的一半时,所对应的温度称为熔解温度。
A. 对
B. 错
题目解答
答案
B
解析
熔解温度(Tm)是DNA双链完全解链的温度,其定义通常基于吸光度变化曲线。关键点在于:
- 吸光度监测波长:DNA的特征吸收峰在260nm(A260),而非280nm(A280)。A280可能受蛋白质等杂质干扰,影响准确性。
- Tm的判定标准:Tm对应的是DNA双链解链50%时的温度,此时吸光度处于初始值与最大值的中点,而非“最大值的一半”。
题目中将熔解温度定义为A280达到最大值一半时的温度,混淆了波长选择和判定标准,因此错误。
关键知识点
- DNA解链与吸光度:双链DNA解链时,分子结构改变导致吸光度增加。完全解链时吸光度达到最大值。
- Tm的实验判定:实际操作中,Tm是吸光度变化曲线的中点温度(即解链50%时的温度),对应初始吸光度与最大吸光度的平均值。
题目错误分析
- 波长错误:熔解温度的测定通常使用A260,而非A280。
- 判定标准错误:Tm对应的是吸光度的中点(初始值与最大值的平均),而非“最大值的一半”。