题目
一 是非题1/20 1 所谓肽单位就是指组成蛋白质的氨基酸残基 2在竞争性抑制剂存在的情况下,即使加入足够量的底物,酶仍不能达到其催化的最大反应速度 3 一级结构决定空间结构,所以蛋白质合成中新生肽链的折叠无须其他蛋白质的帮助. 4 Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸. 5 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12. 6 在某些生物中,RNA也可以是遗传信息的基本携带者 7 生长激素释放抑制因子是一个14肽 8 维生素B1的辅酶形式是TPP 9 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 10 肾上腺素和胰高血糖素都通过cAMP很快地对机体组织发挥作用 11 呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化还原电势逐步增加的方向排列的 12 CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程 13 花生四烯酸广泛存在与植物中,它是哺乳动物的必需脂肪酸 14 即使在饥饿状态下,肝脏也不利用酮体作为燃料分子,而大脑组织在血糖供应不足时会利用酮体作为燃料分子供能 15 不同生物对氨基氮的排泄方式不同,如鱼类以氨的形式直接将氨基氮排出体外;鸟类以尿酸形式,植物和动物以尿素形式将氨基氮排出体外 16 紫外辐射引起的DNA损伤可通过光复活作用修复. 光复活酶虽然在生物界分布很广,从低等单细胞生物直到鸟类都有,但高等哺乳类中却没有 17 逆转录酶存在与所有RNA病毒中,在RNA病毒复制中起作用 18 遗传密码字典在生物界并非完全通用,像原生动物纤毛虫就有例外 19 糖基化是真核生物蛋白质修饰的一种重要方式,内质网和高尔基体两种亚细胞器都能对蛋白质进行糖基化修饰 20 真核生物中同一转录单位可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA 二 用化学结构式完成下列酶促反应4/20 1异柠檬酸裂酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖异构酶 4 烯脂酰辅酶A水化酶 5 丙氨酰tRNA合成酶 三 综合题10/60 1 什么是蛋白质的二级结构?稳定二级结构的主要作用力是什么?多肽链中存在的脯氨酸对α螺旋的形成有何影响,为什么?哪种蛋白质完全由α螺旋构成? 2 电泳是分离生物大分子的主要方法之一,简述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率与其分子量有什么关系? 3 何谓酶促反应动力学?底物浓度,温度和PH值对酶促反应速度各有什么影响?试分之.如果希望反应初速度达到其最大速度的90%,底物浓度应为多大? 4 何谓核酸变性?引起核酸变性的因素有哪些?何谓DNA的熔温度(Tm)?其大小与哪些因素有关? 5从结构和功能两大方面比较E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶 6 Jacob 和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的新领域,具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论.实验步骤1:取20kg新鲜牛的心脏,置于冰上,使用含有0.2M蔗糖,pH为7.2的缓冲液,匀浆(均质化)。问题1:为什么要用心脏组织?并且为什么选用如此大量的组织?问题2:在整个过程中为什么必须使组织始终保持在低温?为什么需要维持pH在7.2左右?问题3:下一步通过什么实验能够获得较纯的组织细胞中的线粒体组分?问题4:纯化的线粒体通过渗透压裂后,样品中含有线粒体膜和线粒体内含物。如何使得蛋白质从样品中沉淀下来?释相应的原理。实验步骤2:沉淀经溶和透后,进行分子量排阻层分离。通过280nm紫外吸收收集各个分离的组分。问题5:为什么使用280nm进行测定?第一个和最后一个组分所含蛋白质的分子特征是什么?实验步骤3:将上一步收集的组分进行离子交换层分离。问题6: 实验步骤3的蛋白质分离的原理是什么?实验步骤4:为了获得能够测序(氨基酸)的高纯度的蛋白质并且进一步特征分,需要使用双向电泳进行纯化。问题7:描述双向电泳的纯化原理。
一 是非题1/20 1 所谓肽单位就是指组成蛋白质的氨基酸残基 2在竞争性抑制剂存在的情况下,即使加入足够量的底物,酶仍不能达到其催化的最大反应速度 3 一级结构决定空间结构,所以蛋白质合成中新生肽链的折叠无须其他蛋白质的帮助. 4 Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸. 5 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12. 6 在某些生物中,RNA也可以是遗传信息的基本携带者 7 生长激素释放抑制因子是一个14肽 8 维生素B1的辅酶形式是TPP 9 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 10 肾上腺素和胰高血糖素都通过cAMP很快地对机体组织发挥作用 11 呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化还原电势逐步增加的方向排列的 12 CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程 13 花生四烯酸广泛存在与植物中,它是哺乳动物的必需脂肪酸 14 即使在饥饿状态下,肝脏也不利用酮体作为燃料分子,而大脑组织在血糖供应不足时会利用酮体作为燃料分子供能 15 不同生物对氨基氮的排泄方式不同,如鱼类以氨的形式直接将氨基氮排出体外;鸟类以尿酸形式,植物和动物以尿素形式将氨基氮排出体外 16 紫外辐射引起的DNA损伤可通过光复活作用修复. 光复活酶虽然在生物界分布很广,从低等单细胞生物直到鸟类都有,但高等哺乳类中却没有 17 逆转录酶存在与所有RNA病毒中,在RNA病毒复制中起作用 18 遗传密码字典在生物界并非完全通用,像原生动物纤毛虫就有例外 19 糖基化是真核生物蛋白质修饰的一种重要方式,内质网和高尔基体两种亚细胞器都能对蛋白质进行糖基化修饰 20 真核生物中同一转录单位可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA 二 用化学结构式完成下列酶促反应4/20 1异柠檬酸裂酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖异构酶 4 烯脂酰辅酶A水化酶 5 丙氨酰tRNA合成酶 三 综合题10/60 1 什么是蛋白质的二级结构?稳定二级结构的主要作用力是什么?多肽链中存在的脯氨酸对α螺旋的形成有何影响,为什么?哪种蛋白质完全由α螺旋构成? 2 电泳是分离生物大分子的主要方法之一,简述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率与其分子量有什么关系? 3 何谓酶促反应动力学?底物浓度,温度和PH值对酶促反应速度各有什么影响?试分之.如果希望反应初速度达到其最大速度的90%,底物浓度应为多大? 4 何谓核酸变性?引起核酸变性的因素有哪些?何谓DNA的熔温度(Tm)?其大小与哪些因素有关? 5从结构和功能两大方面比较E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶 6 Jacob 和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的新领域,具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论.实验步骤1:取20kg新鲜牛的心脏,置于冰上,使用含有0.2M蔗糖,pH为7.2的缓冲液,匀浆(均质化)。问题1:为什么要用心脏组织?并且为什么选用如此大量的组织?问题2:在整个过程中为什么必须使组织始终保持在低温?为什么需要维持pH在7.2左右?问题3:下一步通过什么实验能够获得较纯的组织细胞中的线粒体组分?问题4:纯化的线粒体通过渗透压裂后,样品中含有线粒体膜和线粒体内含物。如何使得蛋白质从样品中沉淀下来?释相应的原理。实验步骤2:沉淀经溶和透后,进行分子量排阻层分离。通过280nm紫外吸收收集各个分离的组分。问题5:为什么使用280nm进行测定?第一个和最后一个组分所含蛋白质的分子特征是什么?实验步骤3:将上一步收集的组分进行离子交换层分离。问题6: 实验步骤3的蛋白质分离的原理是什么?实验步骤4:为了获得能够测序(氨基酸)的高纯度的蛋白质并且进一步特征分,需要使用双向电泳进行纯化。问题7:描述双向电泳的纯化原理。
题目解答
答案
答:问题1:因为心脏的心肌细胞相对于其他组织线粒体含量较高,而柠檬酸合成酶在组织中的相对含量很低。问题2:低温是为了防治酶变性。维持7.2左右的pH有利于溶液偏离酶的等电点,增强酶自身的缓冲能力,保持酶溶液的稳定性。问题3:通过超速离心、膜分离或者超滤等方法。问题4:进行盐。其原理是破坏蛋白质的胶体性质,使之产生沉淀。问题5:因为蛋白质中含有Phe、Trp、Tyr等三种芳香族氨基酸残基,在280nm具有紫外光吸收。第一个组分所含的蛋白质分子量最大,最后一个组分所含的蛋白质分子量最小。问题6:根据蛋白质分子所带电荷的差异和分子极性的不同进行离子交换吸附。问题7:双向电泳双结合了等电聚焦及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,其原理是第一向进行等电聚焦,利用两性电质在聚丙烯酰胺凝胶上形成pH梯度,根据蛋白质的等电点不同对蛋白质进行分离。将所得的凝胶条取出,用含有SDS的缓冲液进行处理,然后放在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶上,使其固定并与浓缩胶连接。进行第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,根据蛋白质分子大小进行分离。这样各个蛋白质根据等电点和分子大小的不同而被分离,分布在二维谱上。双向电泳具有很高的分辨率。2006、真题