题目

有一七肽，经分析，其氨基酸的组成是Lys、Pro、Arg、Phe、Ala、Tyr、Ser。此肽与FDNB反应产生DNP-Phe，经糜蛋白酶作用，此肽断裂成游离的Phe和两个肽段，两个肽段的氨基酸的组成分别是Ala、Tyr、Ser和Pro、Lys、Arg，两个肽段与。FDNB反应分别产生DNP-Ser和DNFL-Lys，此七肽与胰蛋白酶作用，只产生两个肽段。问此七肽的一级结构是什么?并简要写出分析过程。

有一七肽，经分析，其氨基酸的组成是Lys、Pro、Arg、Phe、Ala、Tyr、Ser。此肽与FDNB反应产生DNP-Phe，经糜蛋白酶作用，此肽断裂成游离的Phe和两个肽段，两个肽段的氨基酸的组成分别是Ala、Tyr、Ser和Pro、Lys、Arg，两个肽段与。FDNB反应分别产生DNP-Ser和DNFL-Lys，此七肽与胰蛋白酶作用，只产生两个肽段。问此七肽的一级结构是什么?并简要写出分析过程。


题目解答

答案

1)此肽与FDNB反应产生DNP-Phe得N端为Phe。2)经糜蛋白酶作用此肽断裂成游离的。Phe和两个肽段：Ala、Tyr、Ser和Pro、Lys、Arg推测该肽N端第4位为Tyr(糜蛋白酶作用位点)。3)两个肽段与FDNB反应分别产生DNP-Ser和DNP-Lys得该肽第2位为Ser第3位为．Ala第5位为、Lys。4)此七肽与胰蛋白酶作用只产生两个肽段。说明C末端即第7位必为Pro并与第6位Arg相连使得Arg不能被胰蛋白酶所切断。若C末端为Arg的话则Pro位于倒数第2位其N端与Lys相连C端与Arg相连胰蛋白酶就不能作用。因此该7肽的顺序是N-Phe-Ser-Ala-Tyr-Lys-Arg-Pro-C。
1)此肽与FDNB反应产生DNP-Phe,得N端为Phe。2)经糜蛋白酶作用,此肽断裂成游离的。Phe和两个肽段：Ala、Tyr、Ser和Pro、Lys、Arg,推测该肽N端第4位为Tyr(糜蛋白酶作用位点)。3)两个肽段与FDNB反应分别产生DNP-Ser和DNP-Lys,得该肽第2位为Ser,第3位为．Ala,第5位为、Lys。4)此七肽与胰蛋白酶作用,只产生两个肽段。说明C末端即第7位必为Pro,并与第6位Arg相连,使得Arg不能被胰蛋白酶所切断。若C末端为Arg的话,则Pro位于倒数第2位,其N端与Lys相连,C端与Arg相连,胰蛋白酶就不能作用。因此,该7肽的顺序是N-Phe-Ser-Ala-Tyr-Lys-Arg-Pro-C。

解析

考查要点：本题主要考查对肽链一级结构的推断能力，涉及酶解法和末端分析法的综合应用。关键在于理解不同蛋白酶的作用位点及FDNB试剂的作用原理。

解题核心思路：

  1. 确定N端氨基酸：通过FDNB反应确定肽链的N端为Phe。
  2. 分析糜蛋白酶作用位点：糜蛋白酶作用于芳香族氨基酸（如Tyr）的羧基侧，结合断裂后的肽段组成推断Tyr的位置。
  3. 末端分析法推断内部序列：利用两个肽段与FDNB反应的结果，确定各肽段的N端氨基酸，进而推断原肽链的内部顺序。
  4. 胰蛋白酶作用结果验证C端结构：通过胰蛋白酶的切割特性（作用于Arg或Lys的羧基侧，但受Pro阻碍），确定C端为Arg-Pro结构。

破题关键点：

  • FDNB反应直接给出N端氨基酸。
  • 糜蛋白酶切割位点对应芳香族氨基酸（Tyr）的位置。
  • 胰蛋白酶切割受阻说明C端存在Arg-Pro序列。

1. 确定N端氨基酸

七肽与FDNB反应生成DNP-Phe，说明N端为Phe。

2. 分析糜蛋白酶切割结果

糜蛋白酶作用后释放游离Phe，并生成两个肽段：

  • 肽段1（Ala、Tyr、Ser）：说明切割点位于Tyr的羧基侧（Tyr为芳香族氨基酸）。
  • 肽段2（Pro、Lys、Arg）：剩余部分包含Pro、Lys、Arg。

由此推断原肽链顺序为：Phe-X-X-X-Tyr-X-X-Pro。

3. 推断内部氨基酸顺序

  • 肽段1与FDNB反应生成DNP-Ser：说明肽段1的N端为Ser，对应原肽链第2位为Ser。
  • 肽段2与FDNB反应生成DNP-Lys：说明肽段2的N端为Lys，对应原肽链第5位为Lys。

结合氨基酸组成，推断中间序列为：Ser-Ala-Tyr-Lys-Arg。

4. 验证C端结构

七肽与胰蛋白酶作用仅产生两个肽段，说明C端为Arg-Pro（Pro阻碍胰蛋白酶在Arg后切割）。