(核酸化学 易) 当一种四肽与FDNB反应后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3种氨基酸；当这四肽用胰蛋白酶水解时发现两种碎片段；其中一片用LiBH4还原后再进行酸水解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反应产生紫（红）色产物的氨基酸。试问这四肽的一级结构是由哪几种氨基酸组成的？

考查要点：本题综合考查肽链一级结构的分析方法，涉及FDNB法测定N端、胰蛋白酶的酶切特性、LiBH4还原法确定C端以及氨基酸的特征显色反应。

解题核心思路：

1. FDNB反应确定N端氨基酸为Val；
2. 胰蛋白酶酶切根据专一性推断内部Arg/Lys的位置；
3. LiBH4还原结合水解产物确定C端为Gly；
4. 乙醛酸显色反应识别Trp的存在，结合上述信息推导顺序。

破题关键点：

• N端与FDNB反应产物直接关联；
• 胰蛋白酶切点位于Arg/Lys羧基侧；
• C端还原后生成氨基乙醇表明为Gly；
• **Trp的特征显色反应定位中间氨基酸。

（1）确定N端氨基酸

四肽与FDNB反应后，用HCl水解得到DNP-Val，说明N端为Val（FDNB专一标记N端α-氨基）。

（2）分析胰蛋白酶酶切结果

胰蛋白酶水解四肽得到两个片段，说明内部存在一个Arg或Lys，且酶切发生在该氨基酸的羧基侧。假设四肽为Val-X-Y-Z，则酶切后可能为Val-X和Y-Z。

（3）确定C端氨基酸

其中一个酶解片段用LiBH4还原后水解得到氨基乙醇，说明C端为Gly（LiBH4还原C端羧基生成羟基，水解后释放氨基乙醇）。

（4）识别Trp的存在

水解液中存在与乙醛酸显紫色的氨基酸，说明中间含Trp（Trp的吲哚基团特征显色反应）。

（5）综合推导顺序

结合上述信息：

• N端为Val；
• 内部含Arg/Lys（酶切点）；
• 中间为Trp；
• C端为Gly。

唯一可能的排列为：N-Val-Arg-Trp-Gly-C（或Val-Lys-Trp-Gly，但题目未明确Arg/Lys，需根据选项判断）。