真核生物细胞核内的不均一RNA(hnRNA)分子质量虽然不均一,但是半衰期长,比胞质成熟mRNA更为稳定。( )答案:错误解析:不同细胞类型的hnRNA半衰期不同,一般在几分钟至1h左右,而胞质成熟mRNA的半衰期一般为1~10h,神经细胞的mRNA的半衰期最长,可达数年。2、名词解释题(25分,每题5分)1. 磷酸单酯键答案:磷酸单酯键是单核苷酸分子中,核苷的戊糖与磷酸的羟基之间形成的脱氢酶磷酸酯键。解析:空2. 亚基[暨南大学2019研]答案:亚基是指具有三级结构的多肽链。亚基轨域与亚基之间呈特定的三维空间排布,并以非共价相互作用彼此缔合在一起,它是具有四级结构的蛋白质中最小的单位。解析:空3. 活化能[中山大学2018研]答案:活化能是指分子从常态转变为容易发生化学反应的活跃状态所需要的最低能量。活化能的大小与异构化速率相关,活化能越低,反应速率越快,因此增加降低活化能会有效地促进反应的进行。反应通过降低活化能来促进一些原本很慢的生化酶得以快速通过。解析:空4. 无规卷曲答案:无规卷曲,又称卷曲,是指在蛋白质中,没有一定规则,结构比较零散的一些肽段的结构。解析:空5. 酶答案:酶是生物催化剂,除少数RNA外,几乎都是蛋白质。酶不改变反应的动态平衡,只是通过降低活化能而加快反应推进的速度。根据酵素所催化的反应性质的底物不同,将酶分成六大类:氧化还原酶类、水解酶、转移酶类、裂合酶类、异构酶类和合成酶类。解析:空3、填空题(45分,每题5分)1. 生物膜的流动性主要是由、和(或)所决定的,并且受温度的影响。答案:脂质碳链的长短|脂肪酸不饱和度|胆固醇含量解析:2. 嘌呤环上的第位氮原子与戊糖的第位碳原子相连形成,通过这种相连而成的化合物叫。答案:9|1|假糖苷键|NC|嘌呤核苷解析:3. DNA螺旋通常为B构象,而RNA螺旋为构象,蛋白质或酶变性后的显著特征是维系结构的键的断裂和生物学活性丧失,同时伴随一系列物理、化学性质的改变。答案:A|二硫解析:4. 体内两种主要的环核苷酸是和。其作用是,他们核糖上的位与位磷酸OH环化。答案:cAMP|cGMP|第二信使|3′|5′解析:5. 多数别构酶是既具有,又具有的变构酶。答案:正协同效应|负协同效应解析:6. 糖原和支链淀粉结构上非常相似,构件分子均是,它们之间的连接键有和两种糖苷键。[厦门大学2014研]答案:D葡萄糖|α1,4糖苷键|α1,6糖苷键解析:7. 羧化酶的辅酶是。[中山大学2019研]答案:生物素解析:8. 两条相当伸展的肽链(或同一条肽链的两个伸展的片段)之间形成氢键的结构单元称为。答案:β折叠或β片层结构解析:9. DNA双螺旋直径为nm,双螺旋每隔nm转一圈,约相当于个核苷酸对,糖和磷酸位于双螺旋的侧,碱基位于侧。答案:2.0|3.4|10|外|内解析:4、简答题(25分,每题5分)1. 简述Western Blotting原理过程。[浙江大学2018研]答案: (1)Western Blotting的原理 Western Blot(蛋白免疫印迹)是指通过分析着色的位置和着色深度获得蛋白质在所分析的细胞或组织中会表达情况的信息的实验方法。其原理首先利用SDSPAGE电泳进行对蛋白质化学分析进行分离,然后转移到固相载体(例如NC膜上),固相载体以非共价键表达方式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽神经科学类型及生物学活性不变,转移后的NC膜就称为一个印迹,用于蛋白质的进一步检测。 (2)Western Blotting的过程 ①蛋白质样品的制备:根据实验对象糖类选择合适的蛋白提取方法制备蛋白质样品。 ②SDSPAGE:制备浓缩胶和固化胶,电泳分离核酸样品。 ③转膜:将电泳完毕的凝胶上的蛋白转移到氯纤维素膜(NC膜)上。 ④封闭:将转移完成的NC膜在封闭液中曾封闭。 ⑤一抗杂交:向封闭完的NC膜加入一抗溶液杂交。 ⑥二抗杂交:一抗孵育完成后,清洗NC膜,然后使用二抗溶液杂交。 ⑦底物显色:二抗孵育完成后,清洗NC膜,加入显色液,反应至出现条带。解析:空2. 怎样证明酶是蛋白质?答案: (1)酶能被酸、碱及蛋白酶水解,水解的最终结晶是氨基酸,证明酶是由氨基酸组成的。 (2)酶具有蛋白质所具有的蛋白颜色反应,如双缩脲反应、茚三酮反应、米伦反应、乙醛酸反应。 (3)一切能使蛋白质变性的因素,如热、酸、碱、紫外线等,同样可以使酶变性失活。 (4)酶物理性质具有蛋白质所具有的大分子性质,如不能通过隔膜、可以电泳等。 (5)酶同其他蛋白质一样异性恋是两性电解质,并有一定的等电点。总之,酶是由氨基酸组成的,与其他已知的大分子有着相同的理化性质,所以酶的电化学本质是蛋白质。解析:空3. 指出有D葡萄糖和下列化合物参与反应的反应类型和反应产物。 A.钠汞齐和水 B.亚碘酸 C.稀碱 D.苯肼,在100℃和弱酸条件下 E.浓硫酸 F.稀硝酸 G.Fehling试剂答案:A.还原反应,山梨醇;B.氧化反应,葡萄糖酸;C.异构反应,D葡萄糖、D果糖、D甘露糖;D.氧化成脎,葡萄糖脎;E.脱水,5羟甲基糠醛;F.氧化反应,葡萄糖二酸;G.氧化反应,复杂产物。解析:空4. 试述磺胺类药物抗菌的作用原理。答案:磺胺类药物与物理叶酸的组成成分对氨基苯甲酸的化学结构类似。因此磺胺类药物可以与对氨基苯甲酸竞争细菌体内的二氢叶酸精子还原酶,从而竞争性地抑制该酶的活性,使对于磺胺类药物敏感的细菌很难利用对氨基苯甲酸合成细菌生长所必需的二氢叶酸,最终抑制了细菌的生长、繁殖。人体所必需的叶酸是从食物中获得的,人体不能合成叶酸,故人体服用磺胺类药物只是影响了对磺胺类药物敏感的细菌的生长、繁殖,达到治病的目的。现在常见的增效磺胺类药物还附加了一些二氢叶酸还原酶的抑制剂,使细菌体内的四氢叶酸含量几乎为零,从而增加治疗效果。解析:空5. 简要叙述蛋白质形成寡聚体的生物学意义。答案: (1)四级结构的形成能提高蛋白质的耐用性。亚基结合的普遍性一个好处是有利于减少蛋白质表面积与体积比。减少表面积与体积的比例将会使蛋白质变得更加稳定。 (2)遗传上的经济性和有效性。蛋白质单体的寡聚结合对一种生物来说,在遗传上是经济的。编码一个能装配成同聚多肽的单体所要加密的DNA片段比编码一条与该同聚多肽具有同样相对分子质量的大多肽所需的DNA片段小很多。 (3)协同性。这是寡聚体蛋白(包括寡聚体酶)的一个重要性质。 (4)汇聚酶的活性部位。许多酶的催化效力来自单个轻链的寡聚结合。亚基也许不能构成完整的活性部位,寡聚体的形成可能使所有必需的催化基团汇聚形成酶的活性部位。 (5)寡聚体酶的不同亚基也许执行不同但相关联的反应。解析:空5、计算题(5分,每题5分)1. 一个DNA的相对分子质量为多少时,它的长度可达到16.4nm?答案: 双链DNA的质量长度仅约是2×106(Danm),当某DNA的长度为16.4nm时,其 相对分子质量=1.9×106×16.4=31.2×106 即,当一个DNA的相对分子质量为31.2×106时,它的长度可达到16.4nm。解析:空6、论述题(5分,每题5分)1. 大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质,为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性,常有很大困难。但为了某种目的,请根据下列要求写出具体的方法。 (1)利用溶解度差别进行分离。 (2)利用蛋白质分子大小进行分离。 (3)根据不同电荷进行分离。 (4)已制备有该产物的抗体进行分离。 (5)产物的浓缩。 (6)产物纯度的鉴定。答案: 首先要有一种或几种检测或鉴定基因表达产物的方法,然后,在每一次分离纯化后,检测表达产物存在哪一个级分中。 (1)用硫酸铵或酒精分级沉淀,可根据的溶解度的差别进行分离。 (2)SDSPAGE、凝胶过滤、超离心,以及超滤可对分子量不同的蛋白质进行分离。 (3)对带电行为不同的可以用离子交换层析、等电聚焦、圆盘电泳、毛细管电泳等方法进行分离;但是在使用这一类型的方法时选择溶液的pH至关重要,因为蛋白质的带电行为和溶液的pH密切相关。 (4)如果具备表达产物的抗体,则可以检测法所用亲和层析或免疫沉淀的方法简洁地分离所需要的表达产物。 (5)使用吸附量较大的离子交换层析和,以及对饱和硫酸铵或聚乙二醇反透析,还有冷冻干燥等基本原理都可以达到浓缩样品的目的,然而这些方法使用之时,都存在着脱盐或除去小分子化合物的问题。相比而言,选用合适截留分子量的超滤膜,进行超过滤,往往能同时达到大幅提高浓缩样本和去盐(包括小分子)的目的。 (6)上述的(2)和(3)这两大类用于分离纯化产物的过程,即便也是有样品纯度鉴定的作用。此外,末端分析、质谱和反相的HPLC层析也仪器都是如何有效的样品纯度鉴定的方法。但是应注意,样本的纯度是一个相对的概念。解析:空7、选择题(13分,每题1分)1. 一般来说,生物膜两层脂质分子的流动性是基本一致的,因为( )。A. 脂质双层组分的不对称性是相对的B. 脂质分子结构相近C. 两层脂质分子相互交错D. 脂质分子几种运动方式相同答案:C解析:2. 在食物及饮水中缺碘,可引起( )。A. 神经系统兴奋性增强B. 食欲亢进C. 基础代谢增强D. 血浆促甲状腺激素增加答案:D解析:3. 下列化合物中的哪个不属脂质?( )A. 胆固醇硬脂酸酯B. 甘油三丁酸酯C. 甘油三硬脂酸酯D. 羊毛蜡