未结合胆红素不溶于水，不能与重氮试剂发生直接反应，其关键原因是A. 与葡萄糖醛酸结合B. 与白蛋白结合使亲水基团包含在内C. 有分子内氢键形成D. 与球蛋白结合使亲水基团包含在内E. 处于游离状态

步骤 1：未结合胆红素的结构特点
未结合胆红素（游离胆红素）是血红蛋白的代谢产物，其分子结构中存在亲水基团，但这些基团被分子内的氢键所封闭，因此不溶于水，也不能与重氮试剂直接反应。
步骤 2：分子内氢键的作用
分子内氢键的形成使得未结合胆红素的亲水基团被封闭，从而导致其不溶于水，也不能与重氮试剂发生直接反应。
步骤 3：结合胆红素的结构特点
当胆红素与葡萄糖醛酸结合形成结合胆红素时，亲水基团被暴露出来，使得结合胆红素溶于水，并能与重氮试剂发生直接反应。