题目
层析后样品被稀释的是?A. 凝胶层析B. 离子交换层析C. 亲和层析D. 疏水层析
层析后样品被稀释的是?
A. 凝胶层析
B. 离子交换层析
C. 亲和层析
D. 疏水层析
题目解答
答案
A. 凝胶层析
解析
本题考查不同层析技术的特点,解题思路是分别分析每个选项中层析技术的原理和过程,判断是否会导致样品被稀释。
- A. 凝胶层析:
- 凝胶层析又称分子筛层析,其固定相是多孔凝胶。当样品溶液通过凝胶柱时,不同大小的分子会在凝胶颗粒的孔隙中进行不同程度的扩散。
- 小分子可以进入凝胶颗粒内部的孔隙,在柱中移动速度较慢;大分子不能进入凝胶颗粒内部,只能在凝胶颗粒之间的空隙中移动,移动速度较快。
- 在洗脱过程中,随着洗脱液的不断加入,样品会被洗脱液逐渐稀释。因为洗脱液会不断地将样品从凝胶柱中冲洗出来,使得样品在洗脱液中的浓度逐渐降低。
- B. 离子交换层析:
- 离子交换层析是根据蛋白质等生物分子所带电荷的差异进行分离的。其固定相是带有电荷的离子交换树脂。
- 样品中的分子会与离子交换树脂上的相反电荷基团结合,然后通过改变洗脱液的离子强度或pH值等条件,使结合的分子依次被洗脱下来。
- 在这个过程中,主要是通过离子交换作用来实现分离,并没有额外的大量液体加入导致样品被稀释。
- C. 亲和层析:
- 亲和层析是利用生物分子之间的特异性亲和力进行分离的。其固定相是带有特异性配体的载体。
- 样品中的目标分子会与配体特异性结合,而其他杂质分子则不结合或结合较弱,通过洗脱可以将目标分子从配体上解离下来。
- 整个过程主要是基于特异性结合和解离,不会因为额外的液体加入而使样品被稀释。
- D. 疏水层析:
- 疏水层析是根据蛋白质等生物分子表面疏水性的差异进行分离的。其固定相是带有疏水基团的载体。
- 在高盐浓度下,样品中的分子会与疏水基团结合,然后通过降低盐浓度,使结合的分子依次被洗脱下来。
- 该过程主要是基于疏水相互作用进行分离,不会导致样品被稀释。