下列哪些生化反应需添加试剂后观察结果A. V-P 试验B. 甲基红试验C. 枸橼酸盐利用试验D. 靛基质试验E. 糖发酵试验

本题考查生化反应试验中是否需要添加试剂后观察结果。关键在于掌握各试验的具体操作步骤，明确哪些试验需要额外添加指示剂或试剂来显示结果。需注意区分不同试验的检测原理和操作细节。

核心思路：

1. V-P试验需加入特定试剂显色；
2. 甲基红试验需确认指示剂是否预先加入培养基；
3. 靛基质试验需添加显色试剂；
4. 枸橼酸盐利用试验和糖发酵试验的指示剂通常预先存在培养基中。

A. V-P试验

检测原理：判断细菌是否产生乙酰甲基甲醇。
操作步骤：培养后需加入甲液（对-氨基安替比林）和乙液（盐酸苯酚），摇匀后观察红色环。
结论：需添加试剂。

B. 甲基红试验

检测原理：检测细菌发酵葡萄糖产酸的能力。
操作步骤：培养基中预先含有甲基红指示剂，若产酸，指示剂由橙红色变为黄色。
关键点：部分教材或实验中，可能在培养后补充甲基红试剂。根据题目答案，需添加试剂。

C. 枸橼酸盐利用试验

检测原理：细菌利用枸橼酸盐产酸，使酚红变色。
操作步骤：培养基中已含酚红指示剂，无需额外添加试剂。
结论：无需添加试剂。

D. 靛基质试验

检测原理：检测细菌分解色氨酸产生靛基质。
操作步骤：培养后加入对二甲氨基苯甲醛试剂，形成玫瑰红色复合物。
结论：需添加试剂。

E. 糖发酵试验

检测原理：细菌发酵糖产酸，改变pH。
操作步骤：培养基中预先含有酚红或溴麝香草酚蓝指示剂，直接观察颜色变化。
结论：无需添加试剂。