用洗脱剂按分子量由大到小依次洗脱达到分离目的的分离方法是A. 凝胶过滤法色谱B. 离子交换色谱C. 分配色谱D. 物理吸附色谱

本题考查不同色谱分离方法的原理和特点，解题思路是分别分析每个选项中色谱分离方法的分离依据，然后找出按分子量由大到小依次洗脱达到分离目的的方法。

• A. 凝胶过滤法色谱：
  • 凝胶过滤法色谱又称分子筛色谱，其固定相是多孔性凝胶。
  • 当样品溶液通过凝胶柱时，不同大小的分子会有不同的行为。大分子物质由于不能进入凝胶颗粒的微孔，只能在凝胶颗粒之间的空隙中流动，因此它们在柱中移动的速度较快，会先被洗脱出来。
  • 而小分子物质可以进入凝胶颗粒的微孔中，在柱中移动的路径较长，速度较慢，所以会较晚被洗脱出来。
  • 因此，凝胶过滤法色谱是按分子量由大到小依次洗脱达到分离目的的。
• B. 离子交换色谱：
  • 离子交换色谱的分离依据是离子交换剂与不同离子之间的亲和力差异。
  • 离子交换剂上带有可交换的离子基团，样品中的离子会与这些基团发生交换反应。
  • 不同离子与离子交换剂的亲和力不同，亲和力小的离子先被洗脱下来，亲和力大的离子后被洗脱下来。
  • 所以离子交换色谱不是按分子量大小进行分离的。
• C. 分配色谱：
  • 分配色谱是利用不同物质在固定相和流动相之间的分配系数不同而进行分离的。
  • 分配系数是指物质在固定相和流动相中的浓度之比。
  • 分配系数大的物质在固定相中停留的时间长，后被洗脱出来；分配系数小的物质在流动相中停留的时间长，先被洗脱出来。
  • 它与分子量大小没有直接关系。
• D. 物理吸附色谱：
  • 物理吸附色谱是基于物质在吸附剂表面的吸附和解吸作用进行分离的。
  • 吸附剂对不同物质的吸附能力不同，吸附能力弱的物质先被洗脱下来，吸附能力强的物质后被洗脱下来。
  • 其分离依据不是分子量大小。