题目
提取质粒时,可以用碱裂解法。( )
提取质粒时,可以用碱裂解法。( )
题目解答
答案
正确
解析
本题考查质粒提取方法的相关知识,核心在于判断碱裂解法是否适用于质粒提取。碱裂解法的核心原理是通过改变细胞膜的通透性,使细胞裂解,释放质粒DNA,同时利用DNA在不同盐浓度中的溶解特性实现质粒与蛋白质、染色体DNA的分离。掌握这一方法的关键步骤和原理是解题的关键。
碱裂解法是提取质粒DNA的经典方法,具体步骤如下:
- 细胞裂解:加入含有EDTA和溶菌酶的溶液,破坏细胞壁,使细胞膜通透性增加。
- 碱处理:加入高浓度NaOH和SDS,使细胞膜溶解,释放质粒DNA。
- 中和与沉淀:加入乙酸中和,染色体DNA因分子量大而沉淀,质粒DNA保持溶解状态。
- 纯化:通过离心收集上清液中的质粒DNA,进一步用乙醇沉淀纯化。
关键点:碱裂解法通过物理化学手段选择性保留质粒DNA,因此题目中的说法正确。