题目
荧光法测硫酸奎宁时,激发光波长若选择在320nm,拉曼光的波长为360nm;若激发光波长选择在350nm,拉曼光波长为400nm,荧光波长为448nm,则测定时选择波长应为( )。A. λex320nm,λem360nmB. λex350nm, λem448nmC. λex320nm, λem400nmD. λex320nm, λem448nm
荧光法测硫酸奎宁时,激发光波长若选择在320nm,拉曼光的波长为360nm;若激发光波长选择在350nm,拉曼光波长为400nm,荧光波长为448nm,则测定时选择波长应为( )。
A. λex320nm,λem360nm
B. λex350nm, λem448nm
C. λex320nm, λem400nm
D. λex320nm, λem448nm
题目解答
答案
D. λex320nm, λem448nm
解析
本题考查荧光光谱法的基本原理,关键在于区分荧光与拉曼光的性质,并理解斯托克斯位移的概念。
- 荧光法的核心:检测荧光波长,而非拉曼光。
- 斯托克斯位移:荧光波长通常比激发光波长长,因分子振动弛豫导致能量损失。
- 干扰排除:需避免选择与拉曼光波长相同的发射波长。
关键信息提取
- 激发光320nm时,拉曼光为360nm;
- 激发光350nm时,拉曼光为400nm,荧光为448nm。
- 荧光波长是物质的特征,与激发光无关(只要激发光能量足够)。
选项分析
- 选项A(320nm→360nm):发射波长为拉曼光,错误。
- 选项B(350nm→448nm):虽为荧光,但激发光350nm时拉曼光为400nm,未涉及干扰,但题目要求选择最佳组合。
- 选项C(320nm→400nm):400nm是激发光350nm时的拉曼光,与激发光320nm无关,错误。
- 选项D(320nm→448nm):448nm为荧光波长,且避开拉曼光干扰,正确。