题目
中国大学MOOC: 荧光定量PCR荧光扩增曲线可以分为几个阶段( )。
中国大学MOOC: 荧光定量PCR荧光扩增曲线可以分为几个阶段( )。
题目解答
答案
平台期荧光信号指数扩增阶段荧光背景信号阶段
解析
荧光定量PCR通过实时监测荧光信号变化,分析DNA扩增过程。其扩增曲线的三个阶段对应不同的反应进程:
- 荧光背景信号阶段:初始阶段,模板量少,荧光信号主要为背景噪音。
- 荧光信号指数扩增阶段:模板量呈指数增长,荧光信号快速上升,是定量分析的关键期。
- 平台期:扩增后期,反应成分耗尽,荧光信号增长缓慢甚至停止。
荧光背景信号阶段
- 特点:荧光信号微弱且波动,主要由试剂或仪器的背景噪音引起。
- 原因:此时模板DNA数量极少,扩增尚未显著进行。
荧光信号指数扩增阶段
- 特点:荧光信号迅速上升,曲线呈指数增长。
- 机制:模板DNA每轮循环翻倍,荧光染料结合新生成的双链DNA,释放荧光信号。
平台期
- 特点:荧光信号增长缓慢,曲线趋于平缓。
- 原因:扩增反应成分(如dNTP、酶)耗尽,扩增效率下降。