题目
疏水相互作用色谱的解析洗脱可以下列采取哪些方式实现?( )A. 降低流动相中盐浓度B. 增加流动相中盐浓度C. 向流动相中加入有机溶剂D. 向流动相中加入中性去污剂
疏水相互作用色谱的解析洗脱可以下列采取哪些方式实现?( )
A. 降低流动相中盐浓度
B. 增加流动相中盐浓度
C. 向流动相中加入有机溶剂
D. 向流动相中加入中性去污剂
题目解答
答案
ACD
A. 降低流动相中盐浓度
C. 向流动相中加入有机溶剂
D. 向流动相中加入中性去污剂
A. 降低流动相中盐浓度
C. 向流动相中加入有机溶剂
D. 向流动相中加入中性去污剂
解析
本题考查疏水相互作用色谱的解析洗脱方式相关知识点。解题思路是明确疏水相互作用色谱的原理,即蛋白质等生物分子与固定相表面的疏水基团之间存在疏水相互作用,然后分析每个选项对这种疏水相互作用的影响,若能减弱疏水相互作用,使蛋白质等从固定相上洗脱下来,则该方式可用于解析洗脱。
- 选项A:
在疏水相互作用色谱中,流动相中的盐离子会与蛋白质等生物分子竞争固定相表面的疏水位点。当降低流动相中盐浓度时,盐离子与蛋白质竞争固定相疏水位点的能力减弱,蛋白质与固定相之间的疏水相互作用相对增强,从而使蛋白质更容易从固定相上洗脱下来,所以降低流动相中盐浓度可以实现解析洗脱。 - 选项B:
增加流动相中盐浓度会增强盐离子与蛋白质竞争固定相疏水位点的能力,使得蛋白质更紧密地结合在固定相上,不利于蛋白质的洗脱,因此增加流动相中盐浓度不能实现解析洗脱。 - 选项C:
向流动相中加入有机溶剂,有机溶剂会降低溶液的介电常数,使蛋白质分子表面的疏水基团暴露程度增加,从而减弱蛋白质与固定相之间的疏水相互作用,促使蛋白质从固定相上洗脱下来,所以向流动相中加入有机溶剂可以实现解析洗脱。 - 选项D:
向流动相中加入中性去污剂,中性去污剂具有亲水性头部和疏水性尾部,它可以与蛋白质分子表面的疏水区域结合,形成复合物,从而破坏蛋白质与固定相之间的疏水相互作用,使蛋白质从固定相上洗脱下来,所以向流动相中加入中性去污剂可以实现解析洗脱。