题目
试述高效液相色谱仪有哪些常用检测器,以及各自的特点和适用范闺
试述高效液相色谱仪有哪些常用检测器,以及各自的特点和适用范闺
题目解答
答案
解析
步骤 1：紫外吸收检测器
紫外吸收检测器是一种选择性浓度型检测器，它仅对那些在紫外波长下有吸收的物质有响应。其作用原理和基本结构与一般光分析仪相似，主要由光源、单色器、流通池、接收和电测元件组成。与一般光分析仪的最大区别在于，为减小死体积，此时所采用的吸收池为微量吸收池，其体积一般为 $1\sim 10NL$ 光程为 $2\sim 10mm$。适用于梯度洗脱，在高效色谱中应用广泛，约占70%。
步骤 2：荧光检测器
荧光检测器的最低检出限可达 ${10}^{-12}g\cdot {mL}^{-1}$，灵敏度比紫外吸收检测器高出 $2\sim 3$ 个数量级。由于不同物质的激发波长不同，受激后所产生的荧光波长各异，因此，荧光检测器具有很高的选择性，属于选择性浓度型检测器。适用于稠环芳烃、留族化合物、酶、维生素、色素、蛋白质等天然荧光物质的测定。对于非荧光物质，该检测器的适用范围受到了一定的限制，但可通过与荧光试剂反应转化为荧光物质后检测，扩大其应用范围。其适用于梯度洗脱。
步骤 3：示差折光检测器
示差折光检测器依据不同性质的溶液对光具有不同的折射率，通过连续测量溶液折射率的变化来检测。它是一种通用型检测器，对所有溶质都有响应，但灵敏度较低，适用于梯度洗脱。由于其对温度和流速的变化非常敏感，因此在使用时需要特别注意。
紫外吸收检测器是一种选择性浓度型检测器，它仅对那些在紫外波长下有吸收的物质有响应。其作用原理和基本结构与一般光分析仪相似，主要由光源、单色器、流通池、接收和电测元件组成。与一般光分析仪的最大区别在于，为减小死体积，此时所采用的吸收池为微量吸收池，其体积一般为 $1\sim 10NL$ 光程为 $2\sim 10mm$。适用于梯度洗脱，在高效色谱中应用广泛，约占70%。
步骤 2：荧光检测器
荧光检测器的最低检出限可达 ${10}^{-12}g\cdot {mL}^{-1}$，灵敏度比紫外吸收检测器高出 $2\sim 3$ 个数量级。由于不同物质的激发波长不同，受激后所产生的荧光波长各异，因此，荧光检测器具有很高的选择性，属于选择性浓度型检测器。适用于稠环芳烃、留族化合物、酶、维生素、色素、蛋白质等天然荧光物质的测定。对于非荧光物质，该检测器的适用范围受到了一定的限制，但可通过与荧光试剂反应转化为荧光物质后检测，扩大其应用范围。其适用于梯度洗脱。
步骤 3：示差折光检测器
示差折光检测器依据不同性质的溶液对光具有不同的折射率，通过连续测量溶液折射率的变化来检测。它是一种通用型检测器，对所有溶质都有响应，但灵敏度较低，适用于梯度洗脱。由于其对温度和流速的变化非常敏感，因此在使用时需要特别注意。