题目
维生素B在440~500nm波长的光激发下可发出较强的荧光,而实际测定时选用400nm的激发光,其目的是()A. 克服溶剂的瑞利散射光B. 避免拉曼散射光的干扰C. 消除容器表面的散射光D. 克服溶剂中荧光物质的干扰
维生素B在440~500nm波长的光激发下可发出较强的荧光,而实际测定时选用400nm的激发光,其目的是()
A. 克服溶剂的瑞利散射光
B. 避免拉曼散射光的干扰
C. 消除容器表面的散射光
D. 克服溶剂中荧光物质的干扰
题目解答
答案
B. 避免拉曼散射光的干扰
解析
本题考查荧光分析中的散射光干扰问题。核心思路在于理解不同散射光的波长特性及其对荧光测定的影响。关键点在于:
- 拉曼散射光的波长比激发光长,而瑞利散射光的波长与激发光相同;
- 若激发光波长接近或进入荧光发射波段范围,拉曼散射会与荧光叠加,导致干扰;
- 选择比荧光发射波段更短的激发光,可使拉曼散射光波长远离检测范围,从而避免干扰。
选项分析
- 选项A(瑞利散射):瑞利散射光波长与激发光相同(400nm),而检测的是440-500nm的荧光,二者波段不重叠,因此瑞利散射不会干扰。
- 选项B(拉曼散射):拉曼散射光波长比激发光长(如400nm激发光的拉曼散射波长大约在404-412nm),可能与维生素B的荧光发射波段(440-500nm)无明显重叠。但若使用440nm等接近荧光发射的激发光,拉曼散射波长可能进入检测范围,导致干扰。因此选择更短的激发光(400nm)可有效避免拉曼散射干扰。
- 选项C(容器散射):容器散射通常可通过使用透光材料或光学设计消除,非本题关键。
- 选项D(溶剂荧光干扰):溶剂中荧光物质的激发光通常在更短波段(如水在200nm附近),与本题无关。