________________1）________________________（PPT上的：以离子交换剂为固定相，依据流动相中组分离子与交换剂上平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。）（课本上的：当溶液中存在着A、B两种或两种以上的离子，并通过离子交换层析柱时，原来吸附在离子交换介质上的离子与溶液中高浓度的A、B离子发生交换作用，脱离离子交换介质，游离在流动相中，并随流动相流出来。由于A、B两种离子在同一溶液中的解离度不同，它们所带的净电荷有差异，因此两者在层析柱内的迁移速度不同。从上样起始点至A、B两离子的层析峰间的距离在加大，最终完全分离。基本操作：（1）离子交换剂的选择：阴阳离子交换剂的选择、强弱离子交换剂的选择、不同离子型交换剂的选择、不同基质离子交换剂的选择(2)离子交换剂的预处理、再生和保存(3)层析柱(4)平衡缓冲液的选择(5)上样(6)洗脱(7)样品的浓缩与脱盐）________________利用固定化配体与目的蛋白质之间非常特异的生物亲和力进行吸附，这种结合既是特异的，又是可逆的，改变条件可以使这种结合解除。________________（1）上样，选择适当的条件，包括上样流速、缓冲液种类、pH、离子强度及温度等，以使待分离物质能够充分结合在亲和吸附剂上。（2）洗脱，选用某种能削弱专一性吸附作用的条件（包括：pH值、温度、离子强度、替代物。适量的氢键破坏剂如脲、盐酸胍等），将目的物洗脱下来。洗脱方法可分为：特异性洗脱和非特异性洗脱。特异性洗脱（亲和洗脱），利用洗脱液中的物质与待分离物质或与配体的特异亲和性而将待分离物质从亲和吸附剂上洗脱下来。非特异性洗脱，通过改变洗脱液pH值、温度、离子强度等条件，降低待分离物质与配体的亲和力而将待分离物质洗脱下来。（3）亲和吸附剂的再生和保存，一般可用大量洗脱液或较高浓度的盐溶液洗涤，再用平衡液重新平衡。________________以多孔的凝胶填料为固定相，按分子大小对溶液中各组分进行分离的液相层析方法。________（1）凝胶的选择（2）凝胶的处理和保存（3）层析柱的选择（4）加样（5）洗脱速度