2000U2-140 未婚女，28岁，闭经2年，肛诊：子宫正常大小，孕激素试验阴性，下一步最佳检查方法是A. 垂体兴奋试验B. 基础体温测定C. 染色体检查D. 激素水平测定E. 雌激素试验

步骤 1：理解孕激素试验阴性
孕激素试验阴性意味着患者体内缺乏足够的雌激素，因为孕激素试验是通过给予孕激素来观察是否出现撤退性出血，以判断体内是否有足够的雌激素。如果孕激素试验阴性，说明体内雌激素水平不足，不足以支持孕激素试验的阳性反应。
步骤 2：选择下一步检查方法
在孕激素试验阴性的情况下，下一步需要确定雌激素水平是否正常。雌激素试验是通过给予雌激素来观察是否出现撤退性出血，以判断体内雌激素水平是否正常。如果雌激素试验阳性，说明体内雌激素水平正常，闭经的原因可能在其他方面，如垂体功能、下丘脑功能等。如果雌激素试验阴性，说明体内雌激素水平不足，闭经的原因可能在卵巢功能、肾上腺功能等。