体细胞杂交:(原生质体融合)指在人工控制条件下不经过有性过程,两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。8细胞分化:即由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变,或发育方式改变的过程。9细胞脱分化: 培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过 程就是细胞脱分化。10细胞再分化:即脱分化后的分生细胞在特定的条件下,重新恢复细胞分化能力,并经历 器官发生形成单极性的芽或根, 或经历胚胎发生形成双极性的胚状体, 进一步发育成完整植 物体,这一过程成为细胞再分化。11人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工 胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。12植物细胞全能性:指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息,具备发育完 整植株的潜在能力。13胚状体: 在离体培养过程中产生一种形似胚 (具有明显的根端和芽端) ,功能与胚相同的 结构。14单倍体植物 :单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体 (植物个体 )。具有单套染色体的细胞在人工离体条件下培养, 使其单性发育成植物体。 这种具有单套染色体的植物称为单倍 体植物。法:凹穴培养皿法、微吸管法1)基本培养基筛选( 2)激素种类和浓度调节( 3)渗透压调节6、杂种植物鉴定( 1)与亲代形态特征比较( 2)杂种植物核型分析( 3)同工酶谱分析 41、植物细胞杂种选择的方法有哪几种?(I )互补选择法①白化互补选择法 ②遗传互补选择法 ③营养代谢互补选择法(2)机械选择法(可见标记法) A.凹穴培养皿分离法 B.微吸管分离法 42、细胞大规模培养有哪些培养系统?成批培养、半连续培养、连续培养43、悬浮细胞系在继代培养中其群体生长规律。45、用于制备人工种子的繁殖体主要有哪些?46、控制胚性细胞同步分裂的方法有哪些?(l )抑制剂法 —— 用 DNA 抑制剂处理细胞培养物( 2)低温法 —— 低温处理调控胚状体的 同步生长( 3)渗透压法 —— 利用渗透压调控胚状体的同步生长不同发育阶段的胚,具有不 同的渗透压要求。 (4)分离过筛法( 5)通气法 —— 利用气体调控胚状体的同步发生47、人工种子的应用前景如何? 需要解决那些问题 ?随着研究的深入, 限制其在商业应用中的问题将逐步得到解决,1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。将对作物遗传育种、良种繁育和栽培等起到巨大的推进作用。2、体细胞无性系变异,3、成本问题 目前限制人工种子的商业利用的最大问题是成本,4、繁殖体生产技术和人工种皮材料的研制 48、人工种子利用有何优点?离体繁殖所具备的优势, 可贮藏、因而可周年生产;可直接播种, 减少了试管苗移栽在操作 和管理上的困难, 可机械化操作和常规的田间管理; 可长距离运输, 因此可建立相对集中的 大型生产企业,实现资源和技术优化。49、什么是动物细胞、组织培养技术?50、动物细胞工程技术有哪些?那种技术是动物细胞工程的基础?51、动物细胞培养基成分有哪些?(1) 氨基酸类 ( 2) 维生素类3)大量元素 是调节培养液渗透压的主要成分。由血清提供的,在低血清或无血清培养液中,则需添加铁、铜、锌、硒 等微量元素。5)葡萄糖 能量来源之一,也是某些氨基酸合成的原料。6)有机类( 7)激素类 血清中含有许多激素。8)生长因子类 52、动物细胞培养基有哪几种?无血清培养基成分有哪些?平衡盐溶液、 天然培养基、 合成培养基、 无血清培养液 (由基础培养液和附加成分组成。代血清的补充物: 1)激素和生长因子; 2)结合蛋白类; 3 )低分子量营养因子; 4)贴壁和铺展因子等。 )53、动物细胞冻存和复苏的原则是什么?慢冻快融 54、动物细胞体外培养的形态特征是怎样的?55、动物细胞、组织培养的方法主要有哪些?56、简述动物原代和传代培养方法57、对体外培养细胞进行常规检查主要有那几方面内容?细胞健康状况、培养液 pH、微生物污染、细胞交叉污染、化学物质污染58、动物细胞大规模培养的方法主要有哪些? 1.悬浮培养 2.微载体培养 3.包埋和微囊培养 4、中空纤维法 59、怎样利用原生质体融合与培养技术制造新物种?60、动物细胞培养过程中细胞生长要经过哪几个阶段?原代培养期 、传代期 、衰退期61、动物细胞培养过程中细胞一代生长要经过哪几个阶段?潜伏期、指数生长期、平台期、衰退期 任选一培养技术叙述从外植体到再生植株的完整实验过程。63、根据其发育阶段,干细胞可以分为哪几种类型,根据其分化潜能的大小,又可分为哪几种类型? 胚胎干细胞、成体干细胞 ① 全能干细胞 ② 多能干细胞 ③ 定向干细胞64、人工诱发动物细胞融合方法有哪些?动物杂交细胞的分离方法有哪些? 1、生物诱导细胞融合 2 、化学方法诱导细胞融合 3、物理方法诱导细胞融合 4、激光诱导融合非选择性筛选、选择性筛选65、简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。1.亲本细胞的准备(致敏 B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备)2.细胞融合形成杂交瘤细胞3.杂交瘤细胞的筛选(采用 HAT(含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))选择性培养基)1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。3)胞质体与核体重新组合形成重组细胞。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。1、贮藏问题 人工种子含水量大,常温下易萌发,也易失水干燥。

体细胞杂交:(原生质体融合)指在人工控制条件下不经过有性过程,两种体细胞原生质

体相互融合产生杂种的方法。

8细胞分化:即由于细胞的分工而导致的细胞结构和功能的改变,或发育方式改变的过程。

9细胞脱分化: 培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过 程就是细胞脱分化。

10细胞再分化:即脱分化后的分生细胞在特定的条件下,重新恢复细胞分化能力,并经历 器官发生形成单极性的芽或根, 或经历胚胎发生形成双极性的胚状体, 进一步发育成完整植 物体,这一过程成为细胞再分化。

11人工种子:指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工 胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。

12植物细胞全能性:指植物体的每一个活细胞都具有该植物的全套遗传信息,具备发育完 整植株的潜在能力。

13胚状体: 在离体培养过程中产生一种形似胚 (具有明显的根端和芽端) ,功能与胚相同的 结构。

14单倍体植物 :单倍体是指具有配子体染色体数的孢子体 (植物个体 )。具有单套染色体的

细胞在人工离体条件下培养, 使其单性发育成植物体。 这种具有单套染色体的植物称为单倍 体植物。

法:凹穴培养皿法、微吸管法

1)基本培养基筛选( 2)激素种类和浓度调节( 3)渗

透压调节

6、杂种植物鉴定( 1)与亲代形态特征比较( 2)杂种植物核型分析( 3)同工酶谱分析 41、植物细胞杂种选择的方法有哪几种?

(I )互补选择法①白化互补选择法 ②遗传互补选择法 ③营养代谢互补选择法

(2)机械选择法(可见标记法) A.凹穴培养皿分离法 B.微吸管分离法 42、细胞大规模培养有哪些培养系统?

成批培养、半连续培养、连续培养

43、悬浮细胞系在继代培养中其群体生长规律。

45、用于制备人工种子的繁殖体主要有哪些?

46、控制胚性细胞同步分裂的方法有哪些?

(l )抑制剂法 —— 用 DNA 抑制剂处理细胞培养物( 2)低温法 —— 低温处理调控胚状体的 同步生长( 3)渗透压法 —— 利用渗透压调控胚状体的同步生长不同发育阶段的胚,具有不 同的渗透压要求。 (4)分离过筛法( 5)通气法 —— 利用气体调控胚状体的同步发生

47、人工种子的应用前景如何? 需要解决那些问题 ?

随着研究的深入, 限制其在商业应用中的问题将逐步得到解决,

将对作物遗传育种、良种繁育和栽培等起到巨大的推进作用。

2、体细胞无性系变异,

3、成本问题 目前限制人工种子的商业利用的最大问题是成本,

4、繁殖体生产技术和人工种皮材料的研制 48、人工种子利用有何优点?

离体繁殖所具备的优势, 可贮藏、因而可周年生产;可直接播种, 减少了试管苗移栽在操作 和管理上的困难, 可机械化操作和常规的田间管理; 可长距离运输, 因此可建立相对集中的 大型生产企业,实现资源和技术优化。

49、什么是动物细胞、组织培养技术?

50、动物细胞工程技术有哪些?那种技术是动物细胞工程的基础?

51、动物细胞培养基成分有哪些?

(1) 氨基酸类 ( 2) 维生素类

3)大量元素 是调节培养液渗透压的主要成分。

由血清提供的,在低血清或无血清培养液中,则需添加铁、铜、锌、硒 等微量元素。

5)葡萄糖 能量来源之一,也是某些氨基酸合成的原料。

6)有机类( 7)激素类 血清中含有许多激素。

8)生长因子类 52、动物细胞培养基有哪几种?无血清培养基成分有哪些?

平衡盐溶液、 天然培养基、 合成培养基、 无血清培养液 (由基础培养液和附加成分组成。

代血清的补充物: 1)激素和生长因子; 2)结合蛋白类; 3 )低分子量营养因子; 4)贴壁

和铺展因子等。 )

53、动物细胞冻存和复苏的原则是什么?慢冻快融 54、动物细胞体外培养的形态特征是怎样的?

55、动物细胞、组织培养的方法主要有哪些?

56、简述动物原代和传代培养方法

57、对体外培养细胞进行常规检查主要有那几方面内容?

细胞健康状况、培养液 pH、微生物污染、细胞交叉污染、化学物质污染

58、动物细胞大规模培养的方法主要有哪些? 1.悬浮培养 2.微载体培养 3.包埋和微囊培养 4、中空纤维法 59、怎样利用原生质体融合与培养技术制造新物种?

60、动物细胞培养过程中细胞生长要经过哪几个阶段?

原代培养期 、传代期 、衰退期

61、动物细胞培养过程中细胞一代生长要经过哪几个阶段?

潜伏期、指数生长期、平台期、衰退期 任选一培养技术叙述从外植体到再生植株的完整实验过程。

63、根据其发育阶段,干细胞可以分为哪几种类型,根据其分化潜能的大小,又可分为哪几

种类型? 胚胎干细胞、成体干细胞 ① 全能干细胞 ② 多能干细胞 ③ 定向干细胞

64、人工诱发动物细胞融合方法有哪些?动物杂交细胞的分离方法有哪些? 1、生物诱导细胞融合 2 、化学方法诱导细胞融合 3、物理方法诱导细胞融合 4、激光诱导融合

非选择性筛选、选择性筛选

65、简述利用杂交瘤技术进行单克隆抗体大规模生产的技术步骤与要点。

1.亲本细胞的准备(致敏 B淋巴细胞、骨髓瘤细胞的准备)

2.细胞融合形成杂交瘤细胞

3.杂交瘤细胞的筛选(采用 HAT(含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T))选

择性培养基)

3)胞质体与核体重新组合形成重组细胞。